> Νέα > Βιομηχανικά Νέα

Ποιες είναι οι λειτουργίες του κιτ ELISA;

2022-12-23

Το κιτ ELISA βασίζεται σε στερεά φάση αντιγόνου ή αντισώματος και ενζυμική σήμανση αντιγόνου ή αντισώματος. Το αντιγόνο ή το αντίσωμα που είναι δεσμευμένο στην επιφάνεια του στερεού φορέα εξακολουθεί να διατηρεί την ανοσολογική του δράση, και το σημασμένο με ένζυμο αντιγόνο ή αντίσωμα διατηρεί τόσο την ανοσολογική του δράση όσο και την ενζυμική δράση. Κατά τη στιγμή του προσδιορισμού, το υπό δοκιμή δείγμα (στο οποίο μετράται το αντίσωμα ή το αντιγόνο) αντιδρά με το αντιγόνο ή το αντίσωμα στην επιφάνεια του στερεού φορέα. Το σύμπλοκο αντιγόνου-αντισώματος που σχηματίζεται στον στερεό φορέα διαχωρίζεται από άλλες ουσίες στο υγρό με πλύση.

Προστίθενται αντιγόνα ή αντισώματα επισημασμένα με ένζυμα, τα οποία επίσης συνδέονται με τον στερεό φορέα με αντίδραση. Αυτή τη στιγμή, η ποσότητα του ενζύμου στη στερεά φάση είναι ανάλογη με την ποσότητα της ουσίας στο δείγμα. Μετά την προσθήκη του υποστρώματος της ενζυμικής αντίδρασης, το υπόστρωμα καταλύεται από το ένζυμο για να γίνει έγχρωμα προϊόντα. Η ποσότητα του προϊόντος σχετίζεται άμεσα με την ποσότητα της υπό δοκιμή ουσίας στο δείγμα, επομένως μπορεί να πραγματοποιηθεί ποιοτική ή ποσοτική ανάλυση ανάλογα με το βάθος του χρώματος.

Η υψηλή καταλυτική απόδοση των ενζύμων ενισχύει έμμεσα τα αποτελέσματα της ανοσολογικής απόκρισης, καθιστώντας τον προσδιορισμό ιδιαίτερα ευαίσθητο. Η ELISA μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό αντιγόνων, αλλά μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό αντισωμάτων.

Βασικές αρχές του κιτ ELISA
Χρησιμοποιεί ειδική αντίδραση αντιγόνου και αντισώματος για να συνδέσει το αντικείμενο με το ένζυμο και στη συνέχεια παράγει χρωματική αντίδραση μεταξύ ενζύμου και υποστρώματος για ποσοτικό προσδιορισμό. Το αντικείμενο μέτρησης μπορεί να είναι αντίσωμα ή αντιγόνο.

Υπάρχουν τρία απαραίτητα αντιδραστήρια σε αυτή τη μέθοδο προσδιορισμού:
â Αντιγόνο ή αντίσωμα στερεάς φάσης (ανοσοποιητικό προσροφητικό)
Αντιγόνο ή αντίσωμα σημασμένο με ένζυμο (δείκτης)
â¢ υπόστρωμα για ενζυμική δράση (παράγοντας ανάπτυξης χρώματος)

Στη μέτρηση, το αντιγόνο (αντίσωμα) συνδέεται πρώτα με τον στερεό φορέα, αλλά εξακολουθεί να διατηρεί την ανοσολογική του δραστηριότητα και στη συνέχεια προστίθεται ένα συζυγές (δείκτης) αντισώματος (αντιγόνου) και ενζύμου, το οποίο εξακολουθεί να διατηρεί την αρχική του ανοσολογική δραστηριότητα και ένζυμο. δραστηριότητα. Όταν το συζυγές αντιδρά με το αντιγόνο (αντίσωμα) στον στερεό φορέα, προστίθεται το αντίστοιχο υπόστρωμα του ενζύμου. Δηλαδή, καταλυτική υδρόλυση ή αντίδραση REDOX και χρώμα.

Η απόχρωση του χρώματος που παράγει είναι ανάλογη με την ποσότητα του αντιγόνου (αντισώματος) που θα μετρηθεί. Αυτό το έγχρωμο προϊόν μπορεί να παρατηρηθεί με γυμνό μάτι, οπτικό μικροσκόπιο, ηλεκτρονικό μικροσκόπιο, μπορεί επίσης να μετρηθεί με φασματοφωτόμετρο (όργανο ενζυμικής ετικέτας). Η μέθοδος είναι απλή, βολική, γρήγορη και συγκεκριμένη.

Προηγούμενος:Το Cotaus σας περιμένει στο 2023EBC!

Επόμενο:Γιατί η κυτταρική καλλιέργεια λύει πρώτα τα ερυθρά αιμοσφαίρια;