> Νέα > Βιομηχανικά Νέα

Γιατί η κυτταρική καλλιέργεια λύει πρώτα τα ερυθρά αιμοσφαίρια;

2022-12-23

Βασική εισαγωγή
Το λύμα ερυθροκυττάρων είναι μια από τις πιο απλές και εύκολες μεθόδους για την αφαίρεση των ερυθρών αιμοσφαιρίων, δηλαδή τη διάσπαση των ερυθρών αιμοσφαιρίων με λύμα, το οποίο δεν καταστρέφει τα πυρηνωμένα κύτταρα και μπορεί να αφαιρέσει πλήρως τα ερυθρά αιμοσφαίρια. Η διάσπαση του λύματος είναι μια ήπια μέθοδος αφαίρεσης ερυθρών αιμοσφαιρίων, η οποία χρησιμοποιείται κυρίως για τον διαχωρισμό και τον καθαρισμό των κυττάρων ιστού που διασπείρονται με ενζυμική πέψη, τον διαχωρισμό και τον καθαρισμό των λεμφοκυττάρων και την απομάκρυνση των ερυθρών αιμοσφαιρίων στα πειράματα πρωτεΐνης ιστού και πυρηνικών εκχύλιση οξέος. Τα κύτταρα ιστού που λαμβάνονται από τη λύση των ερυθρών αιμοσφαιρίων δεν περιέχουν ερυθρά αιμοσφαίρια και μπορούν περαιτέρω να χρησιμοποιηθούν για πρωτογενή καλλιέργεια, σύντηξη κυττάρων, κυτταρομετρία ροής, διαχωρισμό και εκχύλιση νουκλεϊκού οξέος και πρωτεΐνης κ.λπ.

Οδηγίες χρήσης
Δείγμα ιστικών κυττάρων
1. Νωποί ιστοί χωνεύτηκαν με πάγκρεας/ένζυμο ή κολλαγενάση και διασκορπίστηκαν σε εναιώρημα απλών κυττάρων και το υπερκείμενο απορρίφθηκε με φυγοκέντρηση.

2. Πάρτε το λύμα ELS από το ψυγείο στους 4, προσθέστε το λύμα ELS στο κυτταρικό ίζημα σε αναλογία 1:3-5 (προσθέστε 3-5 ml λύματος σε 1 ml συμπιεσμένου κυττάρου), φυσήξτε απαλά και ανακατέψτε.

3. Φυγοκεντρήστε στις 800-1000 rpm για 5-8 λεπτά και πετάξτε το πάνω κόκκινο διαυγές υγρό.

4. Το μέρος που καταβυθίστηκε συλλέχθηκε και φυγοκεντρήθηκε με διάλυμα Hank ή διάλυμα καλλιέργειας χωρίς ορό για 2-3 φορές.

5, εάν η ρωγμή δεν είναι πλήρης/ολοκληρωμένη, μπορείτε να επαναλάβετε τα βήματα 2 και 3.

6. Κύτταρα εκ νέου εναιώρησης για επόμενα πειράματα. Εάν εκχυλιστεί RNA, είναι καλύτερο να το κάνετε στο διάλυμα που παρασκευάστηκε από το Βήμα 4 χρησιμοποιώντας νερό DEPC

Τα ερυθρά αιμοσφαίρια έχουν πολύ σύντομο κύκλο ζωής, μόνο 120 ημέρες, αλλά αναπαράγουν αίμα πολύ γρήγορα, και σε αυτήν την περίπτωση είναι ιδιαίτερα ικανά για κυτταρική διαίρεση και είναι τα πιο γρήγορα διαιρούμενα κύτταρα από όλα, επομένως αυτό το κύτταρο είναι πολύ πολύτιμο, οπότε είναι πολύ χρήσιμο για την κυτταρική καλλιέργεια. Είναι πολύ απλό, δεν έχει οργανίδια, μόνο κυτταρικές μεμβράνες και πρωτεΐνες.

Προηγούμενος:Ποιες είναι οι λειτουργίες του κιτ ELISA;

Επόμενο:Απαιτήσεις αντιδραστηρίου και βασική αναπαράσταση της συγκέντρωσης του διαλύματος.